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類器官包埋產(chǎn)品如何提升實(shí)驗(yàn)效率?SE-Gel 使用技巧

更新時(shí)間:2025-07-18點(diǎn)擊次數(shù):54

類器官包埋產(chǎn)品通過優(yōu)化基質(zhì)特性、簡(jiǎn)化操作流程和提升實(shí)驗(yàn)兼容性,提升了實(shí)驗(yàn)效率。以 SE-Gel為例,其設(shè)計(jì)圍繞 高效保護(hù)、快速處理、精準(zhǔn)應(yīng)用 三大核心目標(biāo),結(jié)合以下機(jī)制與技巧實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)效率的突破:

一、SE-Gel 提升實(shí)驗(yàn)效率的核心機(jī)制

仿生保護(hù),減少操作損傷
SE-Gel 采用生物相容性水凝膠替代傳統(tǒng)凍存液,在低溫環(huán)境中形成多孔保護(hù)基質(zhì),顯著減少冰晶對(duì)類器官的物理損傷。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示,使用 SE-Gel 凍存的類器官?gòu)?fù)蘇后存活率可達(dá) 80%,且組織結(jié)構(gòu)與功能活性(如分泌因子、藥物響應(yīng))保持率達(dá) 90%。這一特性避免了傳統(tǒng)基質(zhì)膠依賴導(dǎo)致的酶解損傷(傳統(tǒng)方法細(xì)胞凋亡率高達(dá) 30%-50%),使傳代周期從 7-10 天縮短至 4-5 天,連續(xù)傳代次數(shù)從≤5 代提升至≥15 代。

類器官專用組織包埋膠試劑盒

極簡(jiǎn)流程,適配高通量需求

SE-Gel 為即用型預(yù)配膠液,無需加熱溶解或復(fù)雜濃度調(diào)配,直接從 2-8℃取出冰上平衡后即可使用。單個(gè)樣本包埋耗時(shí)<分鐘,小時(shí)內(nèi)可完成 10-50 例樣本處理,支持多孔板或芯片的高通量操作。例如,配合濟(jì)研生物的 CSwell600 高通量 3D 培養(yǎng)芯片,可實(shí)現(xiàn)鼠源類器官懸浮培養(yǎng),無需基質(zhì)膠包埋,傳代時(shí)直接收集細(xì)胞球,避免酶解步驟,細(xì)胞存活率提升至 90% 以上。

多場(chǎng)景兼容,降低實(shí)驗(yàn)成本

SE-Gel 兼容石蠟與冰凍切片,包埋后的類器官可直接進(jìn)行下游分析。其天然抗凍成分可減少冰凍切片時(shí)的冰晶形成,使類器官形態(tài)完整度提升至 95% 以上,避免了傳統(tǒng)方法中因結(jié)構(gòu)破壞導(dǎo)致的重復(fù)實(shí)驗(yàn)。此外,SE-Gel 凍存液可在 - 20℃穩(wěn)定保存 3 個(gè)月,多次凍融不影響性能,單例綜合成本較傳統(tǒng)方法降低 50% 以上。

二、SE-Gel 高效使用技巧

(一)凍存與復(fù)蘇優(yōu)化

精準(zhǔn)包埋

1. 凍存前將類器官離心(100g,5 分鐘),棄上清后加入適量 SE-Gel,輕柔吹打使細(xì)胞團(tuán)均勻分散。建議包埋體積控制在 10-50μL,僅需 10-100 個(gè)細(xì)胞團(tuán)即可完成操作,減少珍貴樣本浪費(fèi)。

2. 采用程序降溫法:將包埋后的樣本置于 - 80℃冰箱(梯度降溫:-20℃ 1 小時(shí)→-80℃過夜),次日轉(zhuǎn)移至液氮長(zhǎng)期保存,避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的活性損失。

快速?gòu)?fù)蘇

1. 從液氮中取出凍存管后,立即置于 37℃水浴快速解凍(≤2 分鐘),期間輕柔晃動(dòng)加速融化。

2. 復(fù)蘇后直接離心(100g,5 分鐘)去除 SE-Gel,加入預(yù)溫的專用培養(yǎng)基重懸,可直接用于單細(xì)胞測(cè)序、藥敏檢測(cè)等下游實(shí)驗(yàn),無需額外清洗或平衡步驟。

(二)包埋與切片技巧

冰上操作與預(yù)染色定位

1. 全程保持 SE-Gel 冰上處理,避免基質(zhì)成分因溫度升高而變性。可在包埋前向 SE-Gel 中加入配套染色液(藍(lán)色或紅色),使膠滴在體視顯微鏡下清晰可見,切片時(shí)修片誤差<50μm,顯著提升定位精度。

適配不同切片需求

1. 石蠟切片:包埋后的類器官可直接進(jìn)行石蠟包埋,無需二次處理。SE-Gel 的柔性基質(zhì)可避免切片時(shí)的結(jié)構(gòu)塌陷,適合長(zhǎng)期保存蠟塊。

2. 冰凍切片:使用 OCT 包埋時(shí),SE-Gel 的抗凍成分可減少冰晶形成,建議在 - 20℃冷凍 30 分鐘后切片,保持類器官形態(tài)完整度。

(三)實(shí)驗(yàn)體系整合

培養(yǎng)基協(xié)同優(yōu)化
SE-Gel 與濟(jì)研生物的鼠源類器官專用培養(yǎng)基(含鼠源性 Wnt3a、RSPO1 等因子)配合使用時(shí),可將傳代后細(xì)胞倍增時(shí)間縮短至 24-36 小時(shí)(傳統(tǒng)培養(yǎng)基需 48-72 小時(shí)),同時(shí)維持隱窩 - 絨毛等復(fù)雜結(jié)構(gòu)。建議根據(jù)類器官類型選擇配套培養(yǎng)基,例如胃類器官需額外添加前列腺素 E2,肝類器官需補(bǔ)充 HGF。

自動(dòng)化設(shè)備適配
在高通量實(shí)驗(yàn)中,可通過移液工作站將 SE-Gel 精確分配至 96 孔板,配合 CSwell600 芯片實(shí)現(xiàn)類器官懸浮培養(yǎng)。該芯片的納米級(jí)親水涂層微孔板支持自動(dòng)化換液和成像,實(shí)驗(yàn)周期較傳統(tǒng)方法縮短 40%。

(四)質(zhì)量控制與存儲(chǔ)

批次驗(yàn)證與穩(wěn)定性測(cè)試
新批次 SE-Gel 使用前需進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證:取少量類器官凍存后復(fù)蘇,通過臺(tái)盼藍(lán)染色檢測(cè)存活率(應(yīng)>80%),并通過免疫熒光染色觀察標(biāo)志物(如腸類器官的 Lgr5、肝類器官的 Albumin)表達(dá)情況。

規(guī)范存儲(chǔ)與使用

1. 未開封的 SE-Gel 應(yīng)于 2-8℃避光保存,避免冷凍。

2. 溶解后的膠液可在 - 20℃分裝保存 3 個(gè)月,每次使用前于冰上解凍,避免反復(fù)凍融。

3. 避免與其他品牌基質(zhì)膠混用,防止成分干擾導(dǎo)致凝膠異常。

三、與傳統(tǒng)方法的對(duì)比優(yōu)勢(shì)

維度

SE-Gel

傳統(tǒng)瓊脂糖

Matrigel

操作時(shí)間

凍存 / 復(fù)蘇≤30 分鐘,包埋≤5 分鐘 / 樣本

 2 小時(shí)以上溶解 + 30 分鐘凝固,單樣本處理耗時(shí)>15 分鐘

需冰上操作 + 30 分鐘凝膠化,傳代時(shí)酶解需額外 30-60 分鐘

細(xì)胞存活率

復(fù)蘇后存活率 80%,結(jié)構(gòu)完整率 88%

冰凍切片后結(jié)構(gòu)完整率<70%

傳代后存活率 55%±5%,連續(xù)傳代≤5 代

兼容性

兼容石蠟 / 冰凍切片、單細(xì)胞測(cè)序、藥敏檢測(cè)

僅適配石蠟切片,冰凍切片冰晶損傷嚴(yán)重

需二次處理以去除基質(zhì)膠,影響下游分析

成本效益

單例綜合成本降低 50%,支持高通量操作

耗材 + 設(shè)備成本高,樣本浪費(fèi)率>30%

批次差異大,需頻繁優(yōu)化濃度,長(zhǎng)期成本高


四、典型應(yīng)用場(chǎng)景

腫瘤類器官藥敏篩選

使用 SE-Gel 凍存的腫瘤類器官?gòu)?fù)蘇后,可直接接種于 96 孔板進(jìn)行藥物梯度測(cè)試。其穩(wěn)定的三維結(jié)構(gòu)可更真實(shí)反映腫瘤微環(huán)境,藥敏結(jié)果與響應(yīng)一致性達(dá) 75% 以上。

發(fā)育生物學(xué)研究
配合 SE-Gel 的動(dòng)態(tài)模量可調(diào)特性(1-100kPa),可模擬不同組織力學(xué)環(huán)境。例如,腦類器官在低模量(<10kPa)SE-Gel 中培養(yǎng)時(shí),神經(jīng)突生長(zhǎng)長(zhǎng)度較 Matrigel 增加 3 倍,突觸形成效率提升 50%。

微生物 - 宿主互作研究
SE-Gel 的多孔結(jié)構(gòu)允許細(xì)菌定植,可將腸道類器官與益生菌共培養(yǎng),通過熒光標(biāo)記觀察細(xì)菌黏附與宿主免疫反應(yīng),實(shí)驗(yàn)周期較傳統(tǒng) Transwell 模型縮短 40%。

通過上述機(jī)制與技巧,SE-Gel 在類器官培養(yǎng)、凍存、分析的全流程中實(shí)現(xiàn)了效率與可靠性的雙重突破,尤其適用于高通量篩選、長(zhǎng)期模型構(gòu)建及轉(zhuǎn)化研究。建議根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇配套試劑(如培養(yǎng)基、消化液),并嚴(yán)格遵循操作規(guī)范以充分發(fā)揮其性能優(yōu)勢(shì)。


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