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技術(shù)文章
2023-427
近幾十年以來(lái),隨著生命科技的快速發(fā)展,通過(guò)從動(dòng)物組織中提取細(xì)胞在體外大規(guī)模培養(yǎng)用以表達(dá)單克隆抗體、新藥開(kāi)發(fā)等已成為普遍的技術(shù)。細(xì)胞的規(guī)?;瘮U(kuò)培成為新的細(xì)胞培養(yǎng)需求,目前細(xì)胞擴(kuò)增手段主要有:轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)、細(xì)胞工廠和生物反應(yīng)器擴(kuò)培三種方式。轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)所面臨的挑戰(zhàn):轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)雖然投資少、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、技術(shù)成熟、擴(kuò)增只需加轉(zhuǎn)瓶數(shù)量等優(yōu)點(diǎn),但是占地空間大、勞動(dòng)強(qiáng)度大、產(chǎn)率低、細(xì)胞生長(zhǎng)密度低、瓶間差異較難控制等,難以產(chǎn)業(yè)化或規(guī)模化生產(chǎn)。生物反應(yīng)器培養(yǎng)雖然可以大大提高細(xì)胞產(chǎn)率但是剪切力會(huì)降低細(xì)胞的活率...
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2023-427
體外定點(diǎn)突變技術(shù)是當(dāng)前生物學(xué)各領(lǐng)域研究中的一種重要實(shí)驗(yàn)手段,是改造、優(yōu)化基因的便捷方案,是探索啟動(dòng)子調(diào)節(jié)位點(diǎn)的有效手段,也是研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能之間的復(fù)雜關(guān)系的有力工具。蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)決定其功能,二者之間的關(guān)系是蛋白質(zhì)組研究的重點(diǎn)之一。對(duì)某個(gè)已知基因的特定堿基進(jìn)行定點(diǎn)改變、缺失或者插入,可以改變對(duì)應(yīng)的氨基酸序列和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),對(duì)突變基因的表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行研究有助于人類(lèi)了解蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系,探討蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)/結(jié)構(gòu)域。CRISPR-Cas9系統(tǒng)的靶向雙鏈斷裂(DSB),基因組通常通...
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2023-427
對(duì)于制藥企業(yè)而言,當(dāng)某一產(chǎn)品生產(chǎn)完畢后,總會(huì)有一些微生物和少許原輔料殘留于設(shè)備中,在溫度和濕度達(dá)到一定程度時(shí),微生物能夠與原輔料中殘留有機(jī)物出現(xiàn)無(wú)法物化反應(yīng),通過(guò)大量繁殖能夠形成不同類(lèi)型代謝物,這些代謝物會(huì)從一定程度上影響藥物藥效甚至?xí)a(chǎn)生毒副作用,從而使制藥企業(yè)每當(dāng)生產(chǎn)一段時(shí)間或者更換產(chǎn)品后會(huì)存在產(chǎn)品質(zhì)量問(wèn)題,因此無(wú)論維修設(shè)備或設(shè)備空閑一段時(shí)間,需要實(shí)現(xiàn)設(shè)備清潔工作。對(duì)于制藥企業(yè)來(lái)說(shuō),清潔主要針對(duì)設(shè)備中殘留的微生物或者各種代謝物,其總量在不影響藥品規(guī)定的質(zhì)量、藥效及安全性。...
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2023-426
CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)需要通過(guò)下一代測(cè)序(NGS)來(lái)驗(yàn)證,能夠在核苷酸水平分辨率下進(jìn)行大規(guī)模評(píng)估基因編輯的準(zhǔn)確性和可靠性。高效、可自動(dòng)化和可擴(kuò)展的CIRCLE-seq是一種體外NGS測(cè)定,可以對(duì)CRISPR介導(dǎo)的切割進(jìn)行靈敏的脫靶檢測(cè)。CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)CRISPR代表成簇規(guī)律間隔的短回文重復(fù)序列。這些重復(fù)的DNA片段最初來(lái)源于病毒病原體,并作為模板將CRISPR相關(guān)蛋白9(Cas9)核酸內(nèi)切酶引導(dǎo)至新入侵的病毒。當(dāng)Cas9遇到同源病毒序列時(shí),它會(huì)...
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2023-425
HE染色實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案HE染色是石蠟切片技術(shù)中常用的染色方法之一,簡(jiǎn)稱(chēng)為蘇木精-伊紅染色法。該方法使用堿性的蘇木精染液將細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)和胞質(zhì)內(nèi)的核酸染成紫藍(lán)色,同時(shí)使用酸性染料伊紅將細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分染成紅色。1、切片出現(xiàn)白色斑點(diǎn)原因:(1)烘片溫度過(guò)低,導(dǎo)致玻片未干透;(2)切片在二甲苯中停留時(shí)間過(guò)短;(3)二甲苯使用時(shí)間過(guò)長(zhǎng),導(dǎo)致脫蠟不效果不好。對(duì)策:若玻片未干透,先用無(wú)水乙醇去除水分,再重新脫蠟。若斑點(diǎn)是由于停留時(shí)間過(guò)短或使用時(shí)間過(guò)長(zhǎng)造成的,則需重新操...
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