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PCR實驗中DNA回收實驗步驟

【實驗原理】1.DNA片段回收方法：DNA片段在適當濃度的瓊脂糖凝膠中，通上一定電壓進行電泳，不同大小的DNA分子由于遷移率的不同而分離開。切下帶有所需DNA片段的凝膠，用凍融法、玻璃奶回收法或商品化膠回收試劑盒將目的片段回收純化。2.利用Taq酶能夠在PCR產(chǎn)物的3’末端加上一個非模板依賴的A，而T載體是一種帶有3’T突出端的載體，在連接酶作用下，可以把PCR產(chǎn)物插入到質(zhì)粒載體的多克隆位點，可用于PCR產(chǎn)物的克隆和測序。商品化的T載體有很多。本實驗采用TaKaRa公司的pM...

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全自動細胞計數(shù)儀-細胞計數(shù)方法

細胞計數(shù)是確定培養(yǎng)中鋪板的細胞濃度、確定細胞活力和評估細胞分離程序結果的一個組成部分。建議在細胞分離之前進行初始細胞計數(shù)；然后可以將該數(shù)字與細胞分離后的細胞計數(shù)進行比較，以計算細胞恢復率。此外，當預期細胞活力可能會降低時，應進行活細胞計數(shù)，例如，在處理冷凍保存的細胞或離體操作的細胞時。本文描述了如何使用3%乙酸和亞-CH3藍進行總有核細胞計數(shù)，以及如何通過臺盼藍染料排除進行活細胞計數(shù)。實驗步驟和方法：I部分：樣品制備選項1：用3%乙酸和亞-CH3藍對總有核細胞計數(shù)進行細胞稀釋...

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SDS堿裂解法制備質(zhì)粒DNA簡介

近些年來，隨著PCR技術的出現(xiàn)，以及DNA克隆和測序方法的發(fā)展，對大量質(zhì)粒載體和重組子的需求也大大減少。在本方案中，通過堿裂解法的放大（BirnboimａndDoly1979）,質(zhì)粒DNA可從清亮的細菌裂解物中通過含有漠化乙錠的CsCl梯度離心來進行純化。無論是高拷貝數(shù)的質(zhì)粒還是低拷貝數(shù)的質(zhì)粒，通過這種方法可以得到每毫升3?5^g的DNA。重組子的質(zhì)粒一般產(chǎn)量較少，這取決于克隆的DNA片段的大小和特點。材料為正確使用本方案中的器材和危險試劑，必須查閱相應的材料安全數(shù)據(jù)表并咨詢...

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高效消毒劑有哪些

潔凈室和潔凈區(qū)必須定期清潔和消毒。這通常使用清潔劑步驟進行，然后使用消毒劑?？赡苄枰盟コ緞┑臍埩粑?。清潔和消毒也應延伸到設備。此外，對于人員，消毒對于制藥企業(yè)來說很重要。那么高效消毒劑有哪些？本文介紹了在制藥設施中實際應用清潔和驗證程序時要考慮的關鍵點，重點是消毒劑的選擇。洗滌劑對于潔凈室，需要使用清潔劑去除“污垢”（蛋白質(zhì)、油脂等）。洗滌劑滲透污垢并降低表面張力（將土壤固定在表面）以使其去除。為了使消毒劑有效工作，這是必要的。此外，懸浮中的微生物很容易通過沖洗去除或...

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潔凈室消毒方法和使用消毒劑的注意事項

潔凈室是實驗室中重要的區(qū)域，潔凈室的消毒措施也是重要的，那么潔凈室消毒的注意事項有哪些？一、消毒制度的制定潔凈室清潔和消毒涉及許多重要步驟，所以需要制定嚴格的消毒標準、消毒方法等。二、清潔、打掃在制藥業(yè)中，清潔是指從表面去除殘留物和污垢的過程，以達到表面清潔的效果。在進行清潔的過程中一般會使用清潔劑，因為清潔劑可以通過滲透污垢和降低表面張力（將污垢固定在表面）來去除污垢。對于潔凈室，在使用消毒劑之前同樣需要有清潔的步驟。也就是在使用消毒劑之前，清潔設備表面等，從而保證良好的消...

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