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熒光定量PCR實驗中CT值出現(xiàn)異常的原因分析

熒光定量PCR是生物醫(yī)學(xué)中常用的檢測核酸病毒的方法之一，由此，這幾年P(guān)CR儀也成了近幾年臨床檢測和分子生物學(xué)研究的主要實驗室設(shè)備。我們知道CT值是PCR擴增曲線中的重要參數(shù)，那么CT值是什么？它與PCR擴增存在什么關(guān)系？為什么有的時候基因擴增實驗中會出現(xiàn)CT值異常甚至缺少CT值的情況？什么是CT值？在熒光定量PCR擴增實驗中，當(dāng)擴增產(chǎn)物的熒光信號（Fluorescencesignal）達到設(shè)定的熒光閾值（FLUORESCENCEthreshold）時的所對應(yīng)的擴增循環(huán)數(shù)（Cy...

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細胞培養(yǎng)中常見的問題解答

標簽：細胞細胞培養(yǎng)液氮培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)是生命科學(xué)實驗中的基礎(chǔ)實驗，在細胞生長過程中，很多因素都會造成細胞生長不良。下面簡單歸納一下細胞生長不良的原因及對應(yīng)的解決方案。常見問題一：為什么細胞解凍后缺少活力，活細胞占比較低？這種現(xiàn)象可能主要由以下幾種原因所導(dǎo)致：1.培養(yǎng)物凍存液等質(zhì)量欠缺。解決方案：a.確保用來制備儲存物（凍存液）的起始培養(yǎng)物需要保證其健康、無微生物污染、處于生長對數(shù)期后期狀態(tài)。b.收獲細胞時需要小心翼翼，避免細胞損傷。2.儲存物凍存方法不當(dāng)解決方案：a.在液氮冷凍...

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真空離心濃縮儀的原理和應(yīng)用

溶劑去除是制藥、化學(xué)和生物技術(shù)行業(yè)廣泛應(yīng)用中的過程。盡管使用了多種樣品形式和溶劑，但沒有一種單一的溶劑去除技術(shù)可以提供通用的解決方案。隨著冷凍干燥和離心濃縮技術(shù)的不斷成熟，結(jié)合真空泵、冷阱和加熱蒸發(fā)設(shè)備，所開發(fā)的新一代高功率冷阱、真空離心濃縮儀等儀器，既提高了蒸發(fā)性能又改善了樣品完整度，這類儀器還進一步地提升了溶劑回收率，從而減少了蒸發(fā)-濃縮過程對環(huán)境的影響。只有充分了解離心濃縮儀的基本原理與應(yīng)用才能更好地在實驗中發(fā)揮它的作用。溶劑去除的原理在溶劑去除過程中，以熱量的形式施加...

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細胞周期檢查點及其調(diào)節(jié)機制

細胞周期檢查點：§細胞通常在體積翻倍時進行分裂，但實際上細胞分裂過程的控制非常復(fù)雜且精確。細胞分裂的所有過程或步驟都是按順序發(fā)生的，并且細胞知道何時進行以及何時等待和停止細胞分裂。稱為細胞周期?！煸贒NA復(fù)制完成之前或當(dāng)染色體或紡錘體纖維受損時，連續(xù)的細胞分裂會給細胞甚至有機體帶來災(zāi)難性的后果。因此，在進行細胞分裂之前，細胞的各個方面都要通過其內(nèi)部機制進行檢查?！鞕z查點是真核細胞周期中的幾個點之一，在這些點上，可以停止細胞向細胞周期下一階段的進程，直到條件有利?！煸谘h(huán)期間會...

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Southern Blot原理和實驗步驟

SouthernBlot印跡定義：涉及將凝膠上分離的特定DNA、RNA或蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到載體膜上以進行檢測或鑒定的分析技術(shù)稱為印跡。變性片段從凝膠中轉(zhuǎn)移到載體膜上的過程使其易于使用探針或抗體進行分析。根據(jù)要分離的物質(zhì)，印跡技術(shù)可能是——Southern印跡、Northern印跡或Western印跡，它們分別分離DNA、RNA和蛋白質(zhì)。SouthernBlot是一種用于分子生物學(xué)、免疫遺傳學(xué)和其他分子方法的分析技術(shù)，用于從DNA樣品的混合物或DNA鏈中的特定堿基序列中檢測或鑒定感興...

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