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細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法之-磷酸鈣沉淀法

【實驗原理】磷酸鈣沉淀法是基于磷酸鈣-DNA復(fù)合物的一種將DNA導(dǎo)入真核細(xì)胞的轉(zhuǎn)染方法。磷酸鈣有利于促進(jìn)外源DNA與靶細(xì)胞表面的結(jié)合。磷酸鈣-DNA復(fù)合物粘附到細(xì)胞膜并通過胞飲作用進(jìn)入靶細(xì)胞，被轉(zhuǎn)染的DNA可以在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行瞬時表達(dá)，也可整合到靶細(xì)胞的染色體上從而產(chǎn)生不同基因型和表型的穩(wěn)定克隆。該方法可廣泛用于轉(zhuǎn)染許多不同類型的細(xì)胞。細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑【儀器、材料和試劑】（一）儀器、用具CO2培養(yǎng)箱[1]、10cm細(xì)胞培養(yǎng)平板、巴斯德吸管、微量移液器[2]、15ml錐形管、燒杯、量筒...

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CRISPR/Cas9在微藻研究領(lǐng)域的研究和應(yīng)用

CRISPR/Cas（ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats/CRISPR-associatedprotein）系統(tǒng)是當(dāng)前先進(jìn)的基因編輯技術(shù)之一。該技術(shù)因其高效、精確和相對容易操作的特點(diǎn)，在生物醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、生物技術(shù)等領(lǐng)域獲得了廣泛的應(yīng)用。CRISPR/Cas系統(tǒng)主要包含兩個部分：一個能夠識別目標(biāo)DNA序列的導(dǎo)向RNA（gRNA）和一個能夠切割DNA的Cas蛋白。通過設(shè)計特定的gRNA來引導(dǎo)Cas蛋白到特定的DN...

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從干細(xì)胞到心肌細(xì)胞：革命性懸浮培養(yǎng)技術(shù)的崛起

隨著干細(xì)胞技術(shù)的發(fā)展，將干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為心肌細(xì)胞，并將其用于修復(fù)受損的心臟組織。近期，一項懸浮培養(yǎng)技術(shù)的突破為這一目標(biāo)帶來了新的希望。本文將介紹這一革命性技術(shù)的原理、應(yīng)用和生物醫(yī)學(xué)研究的潛在影響。hPSC干細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)的原理：傳統(tǒng)上，將人類胚胎干細(xì)胞（hPSC）轉(zhuǎn)化為心肌細(xì)胞（CM）是一個復(fù)雜的過程，需要精密的生物技術(shù)知識和復(fù)雜的培養(yǎng)條件。然而，最新的研究表明，一種名為懸浮培養(yǎng)技術(shù)的方法正在改變這一局面。這項技術(shù)利用簡單的旋轉(zhuǎn)燒瓶平臺，使廣泛的用戶能夠在不需要過多生物技術(shù)知識...

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探索藻類氫化酶：使用藻類生物反應(yīng)器光合自養(yǎng)微生物中氫氣代謝的新視角

在自然界中，光合自養(yǎng)微生物如藻類和細(xì)菌通過光合作用將水分解為氧氣和電子，進(jìn)而產(chǎn)生能量和有機(jī)物質(zhì)。然而，除了氧氣外，這些微生物還產(chǎn)生了一種令人著迷的氣體：氫氣（H2）。藻類生物反應(yīng)器不僅是研究藻類氫化酶的重要工具，而且是探索光合微生物中H2代謝的理想平臺。通過在這些反應(yīng)器中操作藻類的遺傳工具和重組技術(shù)，科學(xué)家們能夠更精確地調(diào)控氫氣的產(chǎn)生，從而提高藻類生物反應(yīng)器的效率和產(chǎn)量。藻類氫化酶的發(fā)現(xiàn)與意義藻類氫化酶是一類關(guān)鍵的酶，能夠?qū)⒐夂袭a(chǎn)生的電子與質(zhì)子結(jié)合，從而生成氫氣。這些酶的研究...

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核酸電泳分析方法比較

凝膠電泳仍然是核酸分離和分析的既定方法。然而，許多使用預(yù)制凝膠和標(biāo)準(zhǔn)化試劑的自動化系統(tǒng)現(xiàn)在非常流行。這種方法在有大量樣品或需要高通量分析的情況下特別有用。此外，還開發(fā)了安捷倫生物分析儀等系統(tǒng)，無需制備電泳凝膠。它們采用在包含互連微儲器的小型盒單元上構(gòu)建的微流體電路。將樣品涂在一個區(qū)域，并在計算機(jī)控制的電泳下驅(qū)動通過微通道。這些通道通向儲液器，例如允許與其他試劑（例如染料）一起孵育的時間。因此，電泳分離以微米級形式進(jìn)行。小樣本量減少了樣本和試劑的消耗，并且由計算機(jī)控制的裝置允許...

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